Cell Line Nucleofector? Kit V——用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系試劑盒V
Amaxa?Nucleofector?技術(shù)是 Lonza(原Amaxa)公司的專利創(chuàng)新技術(shù),它綜合應(yīng)用傳統(tǒng)的電穿孔技術(shù)及細(xì)胞特異性細(xì)胞核轉(zhuǎn)染液,通過(guò)調(diào)整優(yōu)化的電轉(zhuǎn)參數(shù)(內(nèi)存轉(zhuǎn)染程序),直接把外源基因?qū)朐?xì)胞及細(xì)胞系的細(xì)胞漿和細(xì)胞核中。它不同于傳統(tǒng)的電穿孔儀,因?yàn)樗梢园淹庠椿蛑苯訉?dǎo)入核中,而且細(xì)胞存活率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于電穿孔儀。
Cell Line Nucleofector? Kit V 可以用于Nucleofector? IIs/2b轉(zhuǎn)染儀,這是一種單孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀,支持單孔電轉(zhuǎn)杯的轉(zhuǎn)染平臺(tái),適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系和原代細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染。
與NucleofectorTM IIs/2b儀器搭配使用轉(zhuǎn)染細(xì)胞系,Lonza提供5種不同的Nucleofector溶液,C、L、R、T、V,分別適用于不同細(xì)胞系。每種試劑盒都提供3種規(guī)格,可用于10, 25, 100 (4x25)次反應(yīng)。其中,Nucleofector? L和V溶液需與細(xì)胞系優(yōu)化試劑盒聯(lián)合使用。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1.轉(zhuǎn)染效率高達(dá)90%;
2.數(shù)小時(shí)內(nèi)即表達(dá),在一天內(nèi)可完成轉(zhuǎn)染至分析全部過(guò)程。
試劑盒組分
1. 細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)染液
2. 添加劑
3. 一次性吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)
4 .pmaxGFP? 陽(yáng)性質(zhì)粒
5. 單孔電轉(zhuǎn)杯(100μl)
Nucleofector 細(xì)胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)操作步驟(詳細(xì)Protocol請(qǐng)登錄Lonza官方網(wǎng)站查閱)
整個(gè)操作過(guò)程只需四步,非常簡(jiǎn)單、高效。
第1步:處理細(xì)胞,精確計(jì)數(shù)
第2步:混合DNA、轉(zhuǎn)染液,重懸細(xì)胞,加入轉(zhuǎn)染杯
第3步:將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀,按鍵選擇相應(yīng)程序,按"start"鍵開(kāi)始轉(zhuǎn)染,10秒鐘左右
第4步:取出細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。